Authors:	Nigmatullina, Lira
Title:	Identification of the transcriptional program, establishing adult intestinal stem cells during mouse embryonic development
Online publication date:	2-Jan-2018
Year of first publication:	2018
Language:	english
Abstract:	Die Identität der Dünndarmstammzellen (engl.: intestinal stem cells, ISCs), sowie die an ihrer Selbsterneuerung und Differenzierung beteiligten Mechanismen waren und sind das Thema vieler grundlegenden Studien. Lgr5-positive (Lgr5 ) ISCs halten die Gewebehomöostase aufrecht und alle Zellarten des Darmepithels entstammen aus diesen. Dennoch sind die Mechanismen, die für die Etablierung der Lgr5 ISCs während der embryonalen Darmentwicklung verantwortlich sind, bisher unbekannt. Eine in vivo Analyse der Zellabstammung zeigt, dass die ersten Lgr5 ISC-Vorläufer als eigenständige Zellpopulation im Embryonalstadium E13.5 auftauchen und zum adulten Stammzellenpool beitragen. Eine RNA-Sequenzierung des embryonalen Epithels zeigt weiterhin, dass Lgr5 Zellen Wnt-positiv sind und adulte ISC-Marker wie z.B. Axin2, CD44 und Ascl2 exprimieren. In dieser Arbeit wird Id2, ein Transkriptionsregulator der bHLH-bindende Proteine inhibiert, als ein essentieller Kontrollfaktor für die Anzahl und den Zeitpunkt des Auftretens der Lgr5 ISCVorläufer im Dünndarmepithel identifiziert. Ohne Expression des Id2-Gens beobachtete ich die vorzeitige Aktivierung des Wnt-Signalwegs, das Auftauchen Lgr5 Zellen bereits im Stadium E9.5, sowie drastische Veränderungen der Molekularsignatur im gesamten Darmepithel. Mit Wnt C-59, einem pharmakologischen Inhibitor der Wnt-Sekretion, zeigte ich in vivo, dass die ektopische Wnt-Expression für die vorzeitige Formation von Lgr5 Zellen in Id2-Knockouts (Id2-/-) verantwortlich ist. Die Abstammungsanalyse von vorzeitigen Lgr5 Zellen zeigte ihre Entwicklung zu adulten ISCs,jedoch unterscheiden sich hierbei die Molekularsignaturen signifikant zwischen Wildtyp und Id2-/- Darmepithel. Weiterhin stellte ich fest, dass embryonale Id2-/- Zellen in ex vivo Kultur vor allem zu undifferenzierten Spheroiden, die positiv für Krebszellmarker wie z.B. Trop2, Cnx43 und zytoplasmatisches EpCam sind, heranwachsen. Dies weist darauf hin, dass Id2 wichtig für die Embryonalproliferation und -differenzierung im Darmepithel ist. Insgesamt zeigt meine Arbeit, dass der Verlust der Id2-Expression eine Erhöhung der Lgr5 Zellzahl im Dünndarm bewirkt, die Zelldifferenzierung beeinträchtigt und zur Tumorentwicklung beiträgt.
DDC:	570 Biowissenschaften 570 Life sciences
Institution:	Johannes Gutenberg-Universität Mainz
Department:	Externe Einrichtungen
Place:	Mainz
ROR:	https://ror.org/023b0x485
DOI:	http://doi.org/10.25358/openscience-4112
URN:	urn:nbn:de:hebis:77-diss-1000017077
Version:	Original work
Publication type:	Dissertation
License:	In Copyright
Information on rights of use:	https://rightsstatements.org/vocab/InC/1.0/
Extent:	115 Seiten
Appears in collections:	JGU-Publikationen