Please use this identifier to cite or link to this item: http://doi.org/10.25358/openscience-3479
Authors: Richter, Christoph Martin
Title: Regulatorische und supprimierte T-Zellen
Online publication date: 24-Jan-2006
Year of first publication: 2006
Language: german
Abstract: Regulatorische T-Zellen (Tregs) sind in der Lage die Proliferation und Cytokin-Produktion konventioneller T-Zellen zu supprimieren, wobei die beteiligten Moleküle weitestgehend unbekannt sind. Im Rahmen dieser Arbeit wurden differentielle Analysen sowohl auf mRNA - als auch auf Proteinebene durchgeführt um Moleküle zu identifizieren, welche präferentiell in regulatorischen bzw. in supprimierten T-Zellen (Tsups) exprimiert werden. Der Transkriptionsfaktor Pur-alpha konnte als präferentiell in murinen Tsups exprimiert identifiziert werden. Die präferentielle Expression von Pur-alpha in murinen Tsups konnte durch quantitative PCR-Analysen bestätigt werden. In humanen Tregs konnte mittels „differentieller Proteom-Analyse“ das Lektin Galectin-10 als das am stärksten präferentiell exprimierte Protein identifiziert werden. Die differentielle Expression von Galectin-10 konnte sowohl auf mRNA-Ebene als auch mit Hilfe eines spezifischen Antiserums gegen Galectin-10 bestätigt werden. Zur Untersuchung einer möglichen Beteiligung von Galectin-10 am anergen Phänotyp sowie an den suppressiven Eigenschaften von Tregs wurde ein Galectin-10-Expressionskonstrukt generiert. Die Überexpression von Galectin-10 in konventionellen T-Zellen führte zur Apoptose der transfizierten Zellen. Die Überexpression von Galectin-10 in der humanen T-Zell-Linie „Jurkat“ konnte hingegen problemlos durchgeführt werden, führte aber nicht zur Vermittlung suppressiver Eigenschaften. Zum Nachweis einer Beteiligung von Galectin-10 an den funktionellen Eigenschaften regulatorischer T-Zellen werden in weiterführenden Versuchen momentan siRNA-Experimente etabliert, um die Galectin-10-Biosynthese in Tregs spezifisch zu unterdrücken.
Regulatory T cells (Tregs) have the capacity to efficiently suppress the proliferation and cytokine-production of conventional T cells, although the molecules that are involved in this process are still elusive. Here, differential display analyses at the protein- and mRNA- level were used to identify molecules which are preferentially expressed in regulatory and in suppressed T cells (Tsups). The transcription factor Pur-alpha was found to be preferentially expressed in murine Tsups. This preferential expression of Pur-alpha in murine Tsups was confirmed by quantitative RT-PCR-analyses. In human Tregs the protein with the strongest preferential expression (identified by “differential proteome-analyses”) was galectin-10. The expression of galectin-10 in human regulatory T cells was confirmed on mRNA- as well as on protein-level, using a polyclonal antibody against galectin-10. To examine a potential function of galectin-10 for the maintenance of the anergic phenotyp and for the suppressive capacity of Tregs, an expression-construct for galectin-10 was generated. The expression of galectin-10 in conventional T cells led to apoptosis, whereas the expression of galectin-10 in the human T cell lineage ”Jurkat” did not confer suppressive activity to these cells. To provide evidence for the functional involvement of galectin-10 for the suppressive capacity of Tregs, RNA-interference-experiments are currently beeing established.
DDC: 570 Biowissenschaften
570 Life sciences
Institution: Johannes Gutenberg-Universität Mainz
Department: FB 10 Biologie
Place: Mainz
ROR: https://ror.org/023b0x485
DOI: http://doi.org/10.25358/openscience-3479
URN: urn:nbn:de:hebis:77-9270
Version: Original work
Publication type: Dissertation
License: In Copyright
Information on rights of use: https://rightsstatements.org/vocab/InC/1.0/
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