Please use this identifier to cite or link to this item: http://doi.org/10.25358/openscience-1631
Authors: Arslan Yildiz, Ahu
Title: In-vitro synthesis and reconstitution of cytochrome bo 3 ubiquinol oxidase in artificial membranes
Online publication date: 9-Feb-2010
Year of first publication: 2010
Language: english
Abstract: Forschung über Membranenproteine stellt strenge Hindernisse, seit ruhigem gerade wenige Beispiele der Membranenproteinsorten sind gekennzeichnet worden in den verwendbaren experimentellen Plattformen gegenüber. Die Hauptherausforderung ist, ihre ausgezeichnete entworfene strukturelle Vollständigkeit zu konservieren, während die Ausdruck-, Lokalisierungs- und Wiederherstellungprozesse auftreten. In-vitro übersetzungssysteme können Vorteile über auf Zellenbasisgenausdruck zum Beispiel haben, wenn das über-ausgedrückte Produkt zur Wirtszelle giftig ist oder wenn fehlende Pfosten-Übersetzungsänderung in den bakteriellen Ausdrucksystemen die Funktionalität der Säugetier- Proteine oder Mangel an vorhandenem Membranenraum verdirbt, Funktionsausdruck verbieten.rn Der Nachahmer von biologische Membranen wie feste gestützte Lipidmembranen sind als Plattform am meisten benutzt, Proteinmembraneninteraktionen nachzuforschen. Wir sind in der Lage, Membranenproteinsorte, da wir eine Plattform für Membranenproteinsynthese vorstellen, nämlich die in-vitrosynthese der Membranenproteine in ein Peptid gestütztes Membranensystem zu adressieren. Die Wiederherstellung der Membranenproteine in den Lipid bilayers resultiert im Allgemeinen mit verschiedenen Proteinanpassungen. Als Alternative erforschen wir dieses System zum ersten Mal, um genaueres Modell zu den zellularen Membranen zu verursachen und ihre Funktion, wie Proteineinfügung, Proteinfunktion und Ligandinteraktionen nachzuahmen.rn In dieser Arbeit ist unser Ziel, komplizierte Transmembraneproteine, wie des Cytochrome bo3-ubiquinol Oxydase (Cyt-bo3) direkt innerhalb der biomimetic vorbildlichen Membrane zu synthetisieren. In unserem System wird festes gestütztes tBLM wie, P19/DMPE/PC als Plattform benutzt. Dieses künstliche Membranensystem mimiks die amphiphile Architektur eines Zelle-abgeleiteten Membranensystems.rn
Research about membrane proteins is facing severe obstacles, since still just few examples of membrane protein species have been characterized in suitable experimental platforms. The major challenge is to preserve their excellent designed structural integrity while the expression, isolation and reconstitution processes occur. In-vitro translation systems may have advantages over cell based gene expression for example, when the over-expressed product is toxic to the host cell or when missing post-translational modification in bacterial expression systems corrupts the functionality of mammalian proteins or lack of available membrane space prohibit functional expression. rn The mimic of a biological membranes such as solid supported lipid membranes are widely used as a platform to investigate protein membrane interactions. We are able to address membrane protein species, since we introduce a platform for membrane protein synthesis, namely the in-vitro synthesis of membrane proteins into a peptide supported membrane system. The reconstitution of membrane proteins in lipid bilayers generally results with different protein conformations. As an alternative, we are exploring this system for the first time to create closer model to the cellular membranes and to mimic their function, such as protein insertion, protein function and ligand interactions.rn In this work our aim is to synthesize complex transmembrane proteins, such as cytochrome bo3-ubiquinol oxidase (Cyt-bo3) directly inside the biomimetic model membrane. In our system, solid supported tBLM such as, P19/DMPE/PC is used as a platform. This artificial membrane system mimicks the amphiphilic architecture of a cell-derived membrane system.rn
DDC: 580 Pflanzen (Botanik)
580 Botanical sciences
Institution: Johannes Gutenberg-Universität Mainz
Department: FB 10 Biologie
Place: Mainz
ROR: https://ror.org/023b0x485
DOI: http://doi.org/10.25358/openscience-1631
URN: urn:nbn:de:hebis:77-21871
Version: Original work
Publication type: Dissertation
License: In Copyright
Information on rights of use: https://rightsstatements.org/vocab/InC/1.0/
Extent: 130 S.
Appears in collections:JGU-Publikationen

Files in This Item:
  File Description SizeFormat
Thumbnail
2187.pdf3.78 MBAdobe PDFView/Open