Untersuchung des murinen, nukleären pSS- und SLE-Autoantigens La/SS-B unter physiologischen und pathophysiologischen Bedingungen

Abstract

Zusammenfassung der Dissertation von Christian Schörner 'Untersuchung des murinen, nukleären pSS- und SLE-Autoantigens La/SS-B unter physiologischen und pathophysiologischen Bedingungen' am Fachbereich Biologie der Johannes Gutenberg-Universität Mainz Seren von Patienten mit Kollagenosen, wie SLE und pSS, enthalten Antikörper gegen das Autoantigen La/ SS-B. Im murinen Tiermodell musste die Expression des La/SS-B verstanden werden. Das murine Strukturgen codierte für 13 Exons, das Start-AUG befand sich im Exon 2. Die alternativen mRNAs unterschieden sich nur in ihrer 5'-UTR. Das Exon 1b war im Vergleich zum Exon 1a am 3'-Ende um 27 Nukleotide verlängert. Die alternativen mRNAs entstanden durch einen Promotorwechsel in Kombination mit einem alternativen Spleißvorgang. Die Polyadenylierung erfolgte an zwei alternativen Polyadenylierungssequenzen. Die mRNAs waren vollständig gesplissen, zytoplasmatisch und funktionell. Die Exon 1a- und die Exon 1c-mRNA wurden ubiquitär exprimiert, die Exon 1b-mRNA dagegen nur in proliferierenden Zellen. Im C-Terminus fand sich eine Nager-spezifische Insertion sowie eine -deletion. Das Protein besaß mit 16 isoelektrischen Proteinformen eine hohe Ladungsheterogenität. NO steigerte die Proteinexpression um das 5fache und bewirkte eine Translokation des Proteins vom Zellkern in das Zytoplasma. Das humane La/SS-B-Neoepitop induzierte in Versuchstieren die Bildung von Antikörper gegen das Neoepitop und natives La/SS-B.

Summary of the dissertation by Christian Schörner 'Investigation of murine, nuclear pSS- and SLE-autoantigen La/SS-B at physiological and pathophysiological conditions' at the department of biology, Johannes Gutenberg-University Mainz, Germany Sera of patients with systemic autoimmune disease such as SLE and Sjögren's syndrom contain antibodies against the autoantigen La/SS-B. In the murine model it is necessary to understand the expression of the murine counterpart. The murine gene encodes 13 exons. The AUG-codon locates in exon 2. The alternative mRNAs differ at the 5'-UTR. Splicing of exon 1b involves an alternative splice site locating 27 nucleotides downstream of the exon 1a splice site. The alternative mRNAs resulted from promoter switch in combination with alternative splicing. Two alternative polyadenylation sequences were used. The mRNAs were characterized as finally processed cytoplasmatic, function mRNAs. Exon 1b-mRNA was only detectable in proliferating cells. Exon 1a- and exon 1c-mRNA were ubiquitous expressed. A rodent a specific insertion and deletion in the C terminal half of the protein was detected. A special feature of the protein with 16 isoelectrical protein forms was a high heterogenity. NO resulted in a 5fold increase of expression and caused a translocation of the protein from nucleus to cytoplasm. Immunization of experimental animals with the human La/SS-B-neoepitope peptide induced antibodies against the neoepitope and native La/SS-B.