Der Einfluss von KSRP auf die IL-5, IL-10 und IL-13 Expression sowie der Expression des Transkriptionsfaktors c-MAF in T-Lymphozyten
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Das Immunsystem des Menschen besteht aus einer angeborenen und adaptiven Immunabwehr. Zytokine spielen im Rahmen einer Immunantwort eine entscheidende regulatorische Rolle. Sie werden von verschiedenen Zellen wie T-Lymphozyten freigesetzt und sind an der Regulation, Differenzierung und Aktivierung von Immunzellen beteiligt. Dabei ist eine strenge Kontrolle des Systems notwendig, um Gewebeschäden und Autoimmunität zu verhindern (1) .
Das RNA-bindende Protein KSRP greift über verschiedene Wege in die Genexpression regulatorisch ein (2). Seine Beteiligung an der Regulation der angeborenen Immunantwort ist bereits bekannt (3, 4). Käfer konnte 2019 (5) zum ersten Mal auch einen Nachweis über KSRP-vermittelte Effekte auf Zellen des adaptiven Immunsystems liefern. In murinen T-Lymphozyten, die aus der Milz von KSRP-defizienten Mäusen und Wildtyp Mäusen isoliert wurden, konnte Käfer in den KSRP-defizienten murinen Zellen im Vergleich zu den Wildtyp Zellen eine stärkere Proliferation von CD4+ T-Lymphozyten nachweisen. Des Weiteren detektierte er erhöhte Werte der Interleukine 5,10 und 13 in KSRP-defizienten murinen CD4+ T-Zellen. Die erhöhte Expression dieser Zytokine ist mit einer T-Helfer Zell (TH2) Immunantwort assoziiert. In dieser Arbeit sollten diese Versuche auf die immortalisierten murine T-Lymphozyten Linie EL4 mit und ohne reduzierte KSRP-Expression übertragen werden. Es sollte getestet werden, ob sich diese Zellen eignen, um KSRP-vermittelte Effekte auf die Expression TH2-assoziierter Zytokine zu untersuchen. Dabei zeigten sich abhängig vom Stimulationsmuster und der Stimulationszeit eine erhöhte mRNA-Expression in den EL4 siKSRP Zellen für IL-5 und IL-13 und erniedrigte Werte in der IL-10 mRNA-Expression im Vergleich zu den EL4 Kontrollzellen. In der Proteinanalyse zeigte sich ein erhöhtes IL-5 und IL-13 Expressionsmuster. Im Fall von IL-5 und IL-13 konnte eine KSRP-abhängige Zytokinexpression in immortalisierten EL4 Zellen nachgewiesen werden. Für IL-10 schienen die eingesetzten Zellen kein geeignetes Testsystem darzustellen.
Weiterhin offen war jedoch über welchen molekularen Mechanismus der Einfluss von KSRP auf die TH2-Immunantwort ausgeübt werden könnte. Daher wurde in dieser Arbeit der mir-155/MAF Signalweg als möglicher indirekter Regulationsmechanismus von KSRP auf die Expression der TH2-assoziierten Zytokine behandelt. Laut Literatur fördert KSRP die Reifung der mir-155, welche wiederum den Abbau des Transkriptionsfaktors MAF fördert (6, 7). Im Vergleich zu den Kontrollzellen, konnte in den siKSRP Zellen nach Stimulation überraschenderweise eine erhöhte mir-155-Expression sowie eine reduzierte c-MAF-Expression nachgewiesen werden. Folglich scheint KSRP die TH2-Zytokinexpression unabhängig von dem mir-155/MAF Signalweg zu beeinflussen. Der zugrundeliegende molekulare Mechanismus konnte nicht geklärt werden und bedarf weiteren Untersuchungen.