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dc.contributor.authorMörbel, Joachim
dc.date.accessioned2000-12-31T23:00:00Z
dc.date.available2001-01-01T00:00:00Z
dc.date.issued2001
dc.identifier.urihttps://openscience.ub.uni-mainz.de/handle/20.500.12030/1082-
dc.description.abstractFür die Etablierung einer Transformationsmethode züchterisch relevanter Sorten von Osteospermum ecklonis (Kapmargerite) wurde zunächst ein geeignetes Protokoll für die Regeneration adventiver Sprosse aus vegetativem Gewebe entwickelt. Anschließend wurden Transformationen von Markergenen durch Kokultur mit Agrobacterium tumefaciens durchgeführt. Hierzu wurden Konstrukte verwendet, die das Gen für ß-D-Glucuronidase (GUS) enthielten und deren Expression in transgenen Pflanzen histochemisch nachgewiesen werden konnte. Kanamycinresistenz erwies sich als geeigneter Selektionsmarker für die Transformation. Es konnten von verschiedenen O. ecklonis Sorten GUS-transgene, nicht-chimäre Pflanzen regeneriert werden.Zur Erzeugung transgener Pflanzen mit dem Ziel der Resistenz gegen LMV (lettuce mosaic potyvirus, Salat Mosaik Virus) wurden drei Konstrukte verwendet. Das erste enthält die kodierende Sequenz der Virusproteine VPg, Pro und 6K2. Durch PCR-Mutation wurde die Proteinase-Schnittstelle zwischen 6K2 und VPg zerstört, sowie Start- und Stopcodon eingeführt. Die anderen LMV-abgeleiteten Konstrukte enthalten nicht translatierbare Fragmente des coat protein Gens in sense und antisense Orientierung.Außerdem wurde O. ecklonis noch mit dem Gen des mutmaßlichen Transkriptionsfaktor SPL3 aus Arabidopsis thaliana unter der Kontrolle eines konstitutiven Promotors transformiert. SPL3 ist an der Regulierung der Blüteninduktion in A. thaliana beteiligt.Regenerierte O. ecklonis wurden durch PCR mit konstruktspezifischen Primern auf Anwesenheit des Transgens und Kontamination durch A. tumefaciens überprüft.de_DE
dc.description.abstractTransformation of Osteospermum ecklonis with constructs for the induction of virus resistance and early flowering A protocol for the regeneration of adventious shoots was established for commercially-used Osteospermum ecklonis (cape daisy) varieties. Leaf discs were incubated with Agrobacterium tumefaciens and transformed with reporter genes like ß-D-glucuronidase (GUS), which were assessed histochemically in transgenic plant tissue. Kanamycin-resistance was used successfully as a selective marker for transgenic tissue. GUS-transgenic, non-chimeric O. ecklonis plants from different varieties were obtained.In order to obtain plants which are resistant against lettuce mosaic potyvirus (LMV), three constructs were used. One contained the coding sequence for the viral proteins VPg, Pro and 6K2. The internal proteinase cleavage site between 6K2 and VPg was destroyed via PCR-mutation of the cDNA. A start and a stop codon were also inserted via PCR. Two other virus-derived constructs contained untranslatable truncated fragments of the coat protein gene in sense and antisense orientation.O. ecklonis was also transformed with the gene of the putative transcription factor SPL3 from Arabidopsis thaliana under the control of a constitutive promotor. SPL3 is a regulator of the induction of flowering in A. thaliana.Regenerated O. ecklonis were tested by PCR with construct-specific primers for the presence of the transgene and contamination with A. tumefaciens.en_GB
dc.language.isoger
dc.rightsInCopyrightde_DE
dc.rights.urihttps://rightsstatements.org/vocab/InC/1.0/
dc.subject.ddc570 Biowissenschaftende_DE
dc.subject.ddc570 Life sciencesen_GB
dc.titleTransformation von Osteospermum ecklonis mit Konstrukten zur Induktion von Virusresistenz und Blühverfrühungde_DE
dc.typeDissertationde_DE
dc.identifier.urnurn:nbn:de:hebis:77-1281
dc.identifier.doihttp://doi.org/10.25358/openscience-1080-
jgu.type.dinitypedoctoralThesis
jgu.type.versionOriginal worken_GB
jgu.type.resourceText
jgu.organisation.departmentFB 10 Biologie-
jgu.organisation.year2001
jgu.organisation.number7970-
jgu.organisation.nameJohannes Gutenberg-Universität Mainz-
jgu.rights.accessrightsopenAccess-
jgu.organisation.placeMainz-
jgu.subject.ddccode570
opus.date.accessioned2000-12-31T23:00:00Z
opus.date.modified2000-12-31T23:00:00Z
opus.date.available2001-01-01T00:00:00
opus.organisation.stringFB 10: Biologie: FB 10: Biologiede_DE
opus.identifier.opusid128
opus.institute.number1000
opus.metadataonlyfalse
opus.type.contenttypeDissertationde_DE
opus.type.contenttypeDissertationen_GB
jgu.organisation.rorhttps://ror.org/023b0x485
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